简答

1. 简述原代培养与传代培养的区别

原代培养是直接从机体获取组织细胞进行的首次培养，细胞生物学特性更接近体内，但传代次数有限、培养难度大；

传代培养是将原代细胞转移至新培养瓶继续培养，可实现细胞大量扩增，但随着传代次数增加，细胞易发生形态、功能变异。

2. 动物细胞体外培养的基本条件有哪些？

① 无菌环境，防止微生物污染；

② 适宜温度，哺乳动物细胞常用37℃；

③ 稳定pH（7.2‑7.4），依靠5% CO₂培养箱维持；

④ 合适渗透压，维持细胞形态；

⑤ 充足营养，基础培养基搭配血清、双抗等添加物。

3. 简述胰蛋白酶在细胞传代中的作用及注意事项

作用：分解细胞间黏附蛋白，使贴壁细胞从瓶壁脱落，实现细胞分散。

注意事项：严格控制消化时间，避免过度消化损伤细胞膜、诱导细胞分化；消化后及时用含血清培养基终止反应。

4. 简述干细胞的分类及特点

分为全能干细胞、多能干细胞、单能干细胞；

共同特点是具有自我更新能力，同时具备向不同类型细胞分化的潜能，可用于组织修复、疾病模型构建。

5. 简述HeLa细胞的来源及应用

来源：1951年取自Henrietta Lacks的人宫颈癌细胞；

应用：首个可无限传代的肿瘤细胞系，广泛用于肿瘤生物学、病毒学、细胞转化等研究。

6. 贴壁细胞与悬浮细胞在培养方式上有何不同？

贴壁细胞依赖固相表面生长，传代需胰酶消化；

悬浮细胞可直接悬浮于培养基，无需贴壁，传代只需稀释或离心重悬，代表细胞有淋巴细胞、RAW264.7。

7. 简述转染与转化的区别

转染是通过实验手段将外源基因导入真核细胞的技术，不改变细胞恶性表型；

转化是细胞发生不可逆遗传改变，表现为增殖加快、永生化，部分细胞获得致瘤性。

8. 简述MTT/CCK‑8检测细胞活力的原理

活细胞内的脱氢酶可将试剂还原为有色产物，产物吸光度与活细胞数量成正比，通过酶标仪检测吸光度，即可判断细胞增殖与活力水平。